在實(shí)驗(yàn)室里，我們常會(huì)看到這樣的現(xiàn)象，培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)幾乎總是添加FBS（胎牛血清）?；蛟S您會(huì)問(wèn)“什么是胎牛血清，它有什么用途？”接下來(lái)文章通蔚生物帶大家聊聊“FBS”。

為什么要在培養(yǎng)基中添加血清

動(dòng)物細(xì)胞不能單獨(dú)在培養(yǎng)基中生長(zhǎng)，必須補(bǔ)充血清。血清作為激素來(lái)源，增強(qiáng)培養(yǎng)基的緩沖作用，并防止酚紅和各種蛋白酶的侵害。近年來(lái)，許多研究人員致力于尋找血清的替代品，例如無(wú)血清培養(yǎng)基和合成培養(yǎng)基。雖然無(wú)血清培養(yǎng)基在不斷發(fā)展，但血清仍然是許多動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)中不可或缺的一部分。作為科研人員需要根據(jù)具體的研究需求選擇最合適的培養(yǎng)方法，并根據(jù)細(xì)胞類(lèi)型和實(shí)驗(yàn)?zāi)康膩?lái)決定是否使用血清或無(wú)血清培養(yǎng)基。

為什么經(jīng)常用胎牛血清

理想情況下，人體細(xì)胞使用人血清，小鼠細(xì)胞使用小鼠血清，因?yàn)橥N血清能提供更適合該物種細(xì)胞生長(zhǎng)的營(yíng)養(yǎng)和生長(zhǎng)因子。然而，由于成本和倫理等原因，這些血清很難獲得。在實(shí)際應(yīng)用中，商業(yè)細(xì)胞培養(yǎng)中經(jīng)常使用胎牛血清（FBS），因?yàn)樗缓瑺I(yíng)養(yǎng)，能夠支持多種細(xì)胞類(lèi)型的生長(zhǎng)。

什么是胎牛血清？胎牛血清的成分有哪些？

胎牛血清（FBS）是從胎牛的血液中提取的，通常來(lái)自胎牛的心臟或臍帶。在血液自然凝固后，通過(guò)離心去除細(xì)胞和血凝塊，從而得到血清。血清中保留了血漿中的大部分蛋白質(zhì)、激素和生長(zhǎng)因子，這些成分對(duì)于細(xì)胞培養(yǎng)至關(guān)重要。

雖然胎牛血清已去除細(xì)胞和凝血因子，但仍留有許多有助于細(xì)胞生長(zhǎng)的成分，包括：

1.粘附因子：促進(jìn)細(xì)胞附著到培養(yǎng)基表面，從而提供細(xì)胞生長(zhǎng)的支撐。

2.生長(zhǎng)因子：如表皮生長(zhǎng)因子（EGF）、胰島素樣生長(zhǎng)因子（IGF）等，刺激細(xì)胞分裂和生長(zhǎng)。

3.激素：如胰島素、類(lèi)固醇激素，調(diào)節(jié)細(xì)胞代謝和功能。

4.脂質(zhì)：包括脂肪酸和膽固醇，支持細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)和功能。

5.鋪展因子：幫助細(xì)胞在培養(yǎng)基表面鋪展，促進(jìn)細(xì)胞分裂和擴(kuò)展。

6.糖類(lèi)：如葡萄糖，為細(xì)胞提供能量。

7.轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白：如白蛋白，幫助運(yùn)輸營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和維持細(xì)胞滲透壓。

5.維生素：如維生素A、維生素D，參與細(xì)胞代謝和功能調(diào)節(jié)。

胎牛血清有什么用途？

在許多領(lǐng)域，細(xì)胞培養(yǎng)基的生長(zhǎng)被認(rèn)為非常重要，例如生物技術(shù)、疫苗生產(chǎn)、克隆和體外受精。胎牛血清在適當(dāng)?shù)臐舛认率褂茫梢詽M足細(xì)胞培養(yǎng)物的特定代謝要求，并因其高含量的激素、載體蛋白和大分子蛋白而促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)。例如胚胎干細(xì)胞通過(guò)使用胎牛血清轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)基中，能夠顯著促進(jìn)其生長(zhǎng)。

當(dāng)今市場(chǎng)上的許多疫苗都是使用胎牛血清作為細(xì)胞培養(yǎng)基生產(chǎn)的。例如，用于預(yù)防病毒的疫苗通常利用胎牛血清進(jìn)行生產(chǎn)。最近，在生物技術(shù)領(lǐng)域進(jìn)行的一些克隆動(dòng)物組織的實(shí)驗(yàn)中，經(jīng)常使用胎牛血清。

胎牛血清怎么提取和加工？

就像細(xì)胞培養(yǎng)中使用的大多數(shù)其他動(dòng)物血清一樣，胎牛血清是由從商業(yè)屠宰場(chǎng)收集的血液制成的。胎牛血清生產(chǎn)的第一步是在封閉和隔離的環(huán)境中從牛胎兒中采集血液。在屠宰過(guò)程中，對(duì)牛胎兒進(jìn)行心臟穿刺，從已宰殺的母牛體內(nèi)取出胎兒后，通過(guò)心臟穿刺抽取血液。血液被冷藏以使其自然凝固。

然后，利用離心機(jī)從凝固的血液中去除纖維蛋白凝塊和剩余的血細(xì)胞，得到澄清的黃色（稻草色）血清。第二步是過(guò)濾處理，采用三重?zé)o菌0.1微米濾膜的過(guò)濾鏈進(jìn)行過(guò)濾。處理后，滅菌的胎牛血清由信譽(yù)良好的商業(yè)血清供應(yīng)商進(jìn)行嚴(yán)格的質(zhì)量控制測(cè)試。如果血清通過(guò)了質(zhì)量控制測(cè)試，則會(huì)提供詳細(xì)的分析證書(shū)。

雖然血清采集過(guò)程比較簡(jiǎn)單，雖然過(guò)濾孔可以去除真菌和細(xì)菌，但它們無(wú)法根除病毒。每批都要經(jīng)過(guò)病毒檢測(cè)，從而使所含的病毒失活，其檢測(cè)方法如下：

1、熱滅活胎牛血清

這是經(jīng)過(guò)上述加熱滅活處理的FBS。通過(guò)滅活胎牛血清中所含的補(bǔ)體，可以防止培養(yǎng)過(guò)程中補(bǔ)體系統(tǒng)激活引起的細(xì)胞損傷。另一方面，有些細(xì)胞的數(shù)據(jù)和培養(yǎng)結(jié)果可能會(huì)因失活而受到影響，所以要慎重考慮。

2、γ-輻照胎牛血清

用伽馬射線處理胎牛血清可滅活胎牛血清中的病毒。它可用于存在病毒污染問(wèn)題的情況，例如再生醫(yī)學(xué)研究。

3、活性炭處理（木炭剝離）FBS

使用活性炭去除激素和脂溶性物質(zhì)的胎牛血清。它可用于涉及受激素影響的細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)。

4、不含四環(huán)素的胎牛血清

不含四環(huán)素的胎牛血清是指胎牛血清中不含有抗生素四環(huán)素（tet）。四環(huán)素是一種常用的抗生素，有時(shí)會(huì)在胎牛血清的生產(chǎn)過(guò)程中被添加以防止細(xì)菌污染。然而，在某些特定的生物學(xué)實(shí)驗(yàn)和細(xì)胞培養(yǎng)中，四環(huán)素可能會(huì)干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果或影響細(xì)胞的生長(zhǎng)和行為。因此，需要使用不含四環(huán)素的胎牛血清。盡管號(hào)稱(chēng)“不含”，但由于檢測(cè)極限，不可能完全去除，但各公司都制定了標(biāo)準(zhǔn)，將含有低于一定標(biāo)準(zhǔn)的四環(huán)素的產(chǎn)品作為四環(huán)素進(jìn)行銷(xiāo)售。因此，在購(gòu)買(mǎi)這種血清要留意一下。

5、透析胎牛血清

這是通過(guò)分餾處理不含低分子的胎牛血清，其MWCO低于標(biāo)準(zhǔn)MWCO。用于需要考慮低分子物質(zhì)影響的實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)。由于透析過(guò)程會(huì)去除一些低分子量物質(zhì)，這可能會(huì)降低透析胎牛血清對(duì)某些細(xì)胞系的生長(zhǎng)促進(jìn)能力。因此，在使用透析胎牛血清時(shí)，需要根據(jù)實(shí)驗(yàn)的具體需求和細(xì)胞的特性進(jìn)行選擇和調(diào)整。

6、外泌體耗盡的FBS

FBS用于與外泌體相關(guān)的實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)。用于需要考慮FBS衍生的外泌體（以及其中包含的核酸）影響的實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)。因此在使用外泌體耗盡的FBS時(shí)，需要根據(jù)實(shí)驗(yàn)的具體需求和細(xì)胞的特性進(jìn)行選擇和調(diào)整。

7、ES篩選的FBS

該FBS已被制造商確認(rèn)可維持ES細(xì)胞處于未分化狀態(tài)。研究人員可以減少自己測(cè)試的工作量和成本。

8、IgG耗盡的FBS

由于IgG永遠(yuǎn)不會(huì)被完全去除，因此有時(shí)被稱(chēng)為“低IgG”FBS。它用于在抗體生產(chǎn)、蛋白質(zhì)純化和需要考慮IgG細(xì)胞毒性活性的實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)過(guò)程中培養(yǎng)雜交瘤。

如何保存胎牛血清？

1、儲(chǔ)存和保質(zhì)期

除非標(biāo)簽上另有說(shuō)明，否則所有胎牛血清產(chǎn)品應(yīng)儲(chǔ)存在-20°C或以下的環(huán)境中。研究表明，在這些條件下，血清產(chǎn)品可保存長(zhǎng)達(dá)五年，而幾乎沒(méi)有或沒(méi)有有害影響。請(qǐng)勿使用無(wú)霜或自動(dòng)除冰型冰箱，因?yàn)檫@些冰箱的溫度波動(dòng)可能會(huì)損害血清的質(zhì)量。每個(gè)產(chǎn)品都貼有儲(chǔ)存說(shuō)明標(biāo)簽。

2、解凍分裝

快速解凍胎牛血清產(chǎn)品，優(yōu)選使用37°C的水浴。玻璃瓶在放入水浴之前應(yīng)在室溫下放置一小時(shí)，以免因溫度驟變而破裂。請(qǐng)勿反復(fù)冷凍和解凍血清產(chǎn)品，這會(huì)導(dǎo)致血清中的多種活性成分降解。

有時(shí)，血清中可能會(huì)出現(xiàn)脂質(zhì)和/或鈣顆粒，這并不意味著血清的無(wú)菌性或性能存在問(wèn)題。建議將血清等分到無(wú)菌的冷凍容器中，并重新冷凍，以便在需要時(shí)解凍使用。

購(gòu)買(mǎi)FBS時(shí)需要注意的事項(xiàng)

購(gòu)買(mǎi)FBS時(shí)，請(qǐng)注意以下幾點(diǎn)：

1.內(nèi)毒素濃度：

內(nèi)毒素是細(xì)菌細(xì)胞壁的成分，過(guò)高的內(nèi)毒素濃度可能會(huì)對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)產(chǎn)生不良影響。選擇內(nèi)毒素濃度低的FBS，以確保細(xì)胞培養(yǎng)的健康和實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性。

2.血紅蛋白濃度：

血紅蛋白是紅細(xì)胞破裂后釋放到血清中的成分。較高的血紅蛋白濃度可能表明血清的質(zhì)量較低。選擇血紅蛋白濃度低的FBS，有助于獲得更純凈的培養(yǎng)基。

3.過(guò)濾器滅菌時(shí)間和過(guò)濾器孔徑：

過(guò)濾器的滅菌時(shí)間和孔徑直接影響到FBS的無(wú)菌性。通常使用0.1微米或0.2微米的過(guò)濾器進(jìn)行無(wú)菌過(guò)濾，以去除微生物和顆粒。了解過(guò)濾過(guò)程的詳細(xì)信息可以幫助確保產(chǎn)品的無(wú)菌性。

4.原產(chǎn)地：

不同地區(qū)生產(chǎn)的FBS質(zhì)量可能有所不同。了解產(chǎn)品的原產(chǎn)地，可以幫助評(píng)估其質(zhì)量和可靠性。

胎牛血清的價(jià)格主要取決于以上因素。一般來(lái)說(shuō)，內(nèi)毒素濃度越低、血紅蛋白濃度越低、滅菌越徹底，價(jià)格越高。產(chǎn)品名稱(chēng)和等級(jí)也可能根據(jù)質(zhì)量和處理方式而有所不同。

5.其他考慮因素

供應(yīng)商的信譽(yù)：選擇信譽(yù)良好的供應(yīng)商，可以確保產(chǎn)品的質(zhì)量和一致性。

批次間一致性：了解供應(yīng)商是否能夠提供批次間一致的產(chǎn)品，以確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可重復(fù)性。

分析證書(shū)（CoA）：在購(gòu)買(mǎi)前索取并查看產(chǎn)品的分析證書(shū)，確保其符合實(shí)驗(yàn)需求。

通過(guò)考慮這些因素，可以選擇到高質(zhì)量的FBS，確保實(shí)驗(yàn)的成功和數(shù)據(jù)的可靠性。

關(guān)于原產(chǎn)國(guó)，如果是來(lái)自大生產(chǎn)商的FBS，我認(rèn)為沒(méi)有問(wèn)題，因?yàn)閯?dòng)物在進(jìn)口前已經(jīng)經(jīng)過(guò)徹底檢查，血清的主要生產(chǎn)地包括：

澳大利亞

新西蘭

美國(guó)

加拿大

墨西哥

智利

烏拉圭

巴西（*根據(jù)地區(qū)的不同，無(wú)法進(jìn)口）

哥倫比亞

法國(guó)

西班牙

荷蘭

通蔚生物胎牛血清，源于優(yōu)質(zhì)的胎牛來(lái)源，經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的篩選和處理，確保每一滴血清都達(dá)到最高的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。胎牛血清采用先進(jìn)的生產(chǎn)工藝，確保血清中的營(yíng)養(yǎng)成分和生長(zhǎng)因子得到最大程度的保留，為細(xì)胞提供最優(yōu)質(zhì)的生長(zhǎng)環(huán)境。

通蔚生物胎牛血清都能為您的實(shí)驗(yàn)提供穩(wěn)定的支持。其高濃度的生長(zhǎng)因子和豐富的營(yíng)養(yǎng)成分，有效促進(jìn)細(xì)胞的生長(zhǎng)和分化，讓您的實(shí)驗(yàn)成果更加顯著。