鋅含量檢測試劑盒
測定意義
鋅是必需的微量元素之一,在胰島素和卟啉代謝中也起重要作用。本試劑盒適用于檢測血清、血漿、尿液、乳汁中的鋅含量。
測定原理
鋅離子與試劑 5-Br-PADAP 的特異性顯色反應(yīng)。在特定的酸堿度條件下,鋅離子(Zn2?)與5-Br-PADAP能形成穩(wěn)定的、具有特征顏色的絡(luò)合物,顏色的深淺與鋅離子濃度成正比。
自備儀器和用品
離心機、可調(diào)式移液槍、可見分光光度計/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、蒸餾水。
試劑組成和配制
試劑一:液體20mL×1瓶,4℃避光保存。
標(biāo)準(zhǔn)液:液體×1支,1mM Zn2+標(biāo)準(zhǔn)液。4℃避光保存。臨用前用蒸餾水稀釋到30μM;
在此法測定條件下,Cu2+、Fe2+含量少于68μmol/L不干擾。血清中其他常量和微量元素不干擾,血清中膽紅素含量低于60mg/L不干擾,溶血和渾濁血清有干擾。
測定操作
測定操作
1. 分光光度計/酶標(biāo)儀預(yù)熱30 min,調(diào)節(jié)波長到560 nm,蒸餾水調(diào)零。
2. 標(biāo)準(zhǔn)液解凍:提前取出標(biāo)準(zhǔn)液,置于室溫下充分解凍后混勻。
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加樣方式(μL) |
樣本 |
標(biāo)準(zhǔn)品 |
空白管 |
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蒸餾水 |
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20 |
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樣本 |
20 |
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標(biāo)準(zhǔn)品 |
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20 |
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試劑一 |
180 |
180 |
180 |
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震蕩混勻 30 s,靜置 5 min,在560nm讀取吸光值A(chǔ) |
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注意
正式測定前務(wù)必取 3 - 5 個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定。
預(yù)實驗的意義
比色法檢測試劑盒預(yù)實驗非常重要
1、確定該試劑盒是否適合客戶的樣本檢測,以免造成試劑盒和樣本的浪費(比如低表達處理的樣本);
2、熟悉生化試劑盒的操作流程,尤其是初次使用生化試劑盒測定;
3、確定樣本的處理方法及稀釋倍數(shù)是否合適;
4、了解實驗過程中可能出現(xiàn)的實驗現(xiàn)象或問題,以便于及時作出調(diào)整;
5、通過3 - 5組預(yù)實驗,判斷試劑盒對于樣本的最佳適應(yīng)稀釋濃度范圍,指導(dǎo)實驗樣本稀釋比例。
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