過氧化物酶活性檢測(cè)試劑盒熒光法

測(cè)定意義

POD（EC 1.11.1.7）廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中，可催化過氧化氫氧化酚類和胺類化合物，具有消除過氧化氫和酚類、胺類毒性的雙重作用。

測(cè)定原理

當(dāng)H2O2過量時(shí)，Amplex? Red試劑可用作過氧化物酶活性的超靈敏測(cè)定試劑。在存在過氧化物酶的情況下，Amplex? Red試劑與H2O2以1:1的化學(xué)計(jì)量比發(fā)生反應(yīng)，生成紅色熒光氧化產(chǎn)物試鹵靈。

需自備的儀器和用品

天平、離心機(jī)、熒光酶標(biāo)儀/酶標(biāo)儀、移液器、渦旋混勻儀、黑色96孔板/酶標(biāo)板、勻漿器。

試劑組成和配制

試劑名稱	規(guī)格	數(shù)目	貯藏
提取液	液體100mL	x1	4℃
試劑一	液體200uL	x1	4℃,避光	取10 uL試劑一和990 uL提取液混勻即為試劑一A
試劑二	粉劑	x1	-20℃,避光	臨用前加入6mL提取液溶解，分裝凍存，避免反復(fù)凍融。
試劑三	粉劑	x1	-20℃,避光	臨用前加入78uL試劑四（預(yù)先恢復(fù)至室溫）溶解，現(xiàn)用現(xiàn)配，不可保存。
試劑四	液體	x1	4℃,避光

預(yù)實(shí)驗(yàn)的意義

比色法檢測(cè)試劑盒預(yù)實(shí)驗(yàn)非常重要

1、確定該試劑盒是否適合客戶的樣本檢測(cè)，以免造成試劑盒和樣本的浪費(fèi)（比如低表達(dá)處理的樣本）；

2、熟悉生化試劑盒的操作流程，尤其是初次使用生化試劑盒測(cè)定；

3、確定樣本的處理方法及稀釋倍數(shù)是否合適；

4、了解實(shí)驗(yàn)過程中可能出現(xiàn)的實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象或問題，以便于及時(shí)作出調(diào)整；

5、通過3 - 5組預(yù)實(shí)驗(yàn)，判斷試劑盒對(duì)于樣本的最佳適應(yīng)稀釋濃度范圍，指導(dǎo)實(shí)驗(yàn)樣本稀釋比例。

ELISA試劑盒

PCR試劑盒