犬戊型病毒(Canine Hepatitis Virus E)是犬病毒性肝炎的病原體,犬病毒性肝炎是由犬I型腺病毒和和Ⅱ型腺病毒引起的一種病毒性傳染病,主要侵犯1歲以內(nèi)的幼狗。除犬外,還見(jiàn)于一些野生動(dòng)物。臨床上本病分為犬肝炎型和犬呼吸道型, 犬肝炎型:Ⅰ型腺病毒引起的免疫狀態(tài)決定了臨床表現(xiàn),當(dāng)血清抗體滴度在1:4,1:16及1:500以上時(shí),可分別表現(xiàn)為急性肝壞死,慢性肝炎會(huì)纖維化及局限性損害等。超急性型常于數(shù)小時(shí)內(nèi)表現(xiàn)為消化道的一些癥狀而死亡;急性型則以高熱,咽喉炎,軀干及下腹部水腫,腹痛,嘔吐,腹瀉,出血性素質(zhì)為主要表現(xiàn),病死率達(dá)25%~40%,恢復(fù)期出現(xiàn)眼前房色素層炎和角膜水腫(藍(lán)眼)。本病可侵犯各年齡、品種和性別的犬,但是1歲以內(nèi)的幼犬發(fā)病率和病死率均較高。因此快速檢測(cè)犬戊型病毒具有重要的意義。為此,本公司以探針?lè)╭PCR技術(shù)為基礎(chǔ)開(kāi)發(fā)了犬戊型病毒的檢測(cè)試劑盒,它具有下列特點(diǎn):
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成分 |
規(guī)格 |
包裝 |
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2×Probe qPCR MasterMix |
0.5mL |
0.5mL本色管 |
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熒光PCR專用模板稀釋液 |
1mL |
1.5mL綠蓋管 |
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超純水 |
1mL |
1.5mL藍(lán)蓋管 |
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犬戊型病毒qPCR引物-探針干粉 |
50次 |
0.5mL棕色管 |
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犬戊型病毒qPCR陽(yáng)性對(duì)照(1E7拷貝/μL) |
50μL |
0.5mL黃蓋管 |
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使用手冊(cè) |
1份 |
無(wú) |
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本產(chǎn)品采用五孔盒包裝 |
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注 意:引物-探針干粉在使用前需要短暫離心,然后在離心管中加入165 μL的超純水充分混勻后得到引物-探針混合液再使用,未用完的需要-20℃保存。 |
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稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品以1E1-1E6拷貝/μL這6個(gè)10倍稀釋度為例
由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照,只提供無(wú)傳染性的DNA片段作為陽(yáng)性對(duì)照。
數(shù)據(jù)處理
1. 如果樣本制備陽(yáng)性對(duì)照或PCR陽(yáng)性對(duì)照(包括標(biāo)曲樣本)結(jié)果為陰性,則整個(gè)實(shí)驗(yàn)無(wú)效,不需要分析數(shù)據(jù),需要重新樣本制備,重新進(jìn)行PCR擴(kuò)增或跟廠家聯(lián)系。如果樣本制備陰性對(duì)照或PCR陰性對(duì)照結(jié)果為陽(yáng)性,說(shuō)明環(huán)境污染,則整個(gè)實(shí)驗(yàn)無(wú)效,不需要分析數(shù)據(jù),需要跟廠家聯(lián)系。
2. 如果陰性對(duì)照和陽(yáng)性對(duì)照均正常,則實(shí)驗(yàn)有效,可以進(jìn)入后續(xù)分析。
3. 如果把本試劑盒用于定量檢測(cè),則以陽(yáng)性對(duì)照濃度的log值為橫軸,以Ct值為縱軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。再以待測(cè)樣品的Ct值從標(biāo)準(zhǔn)曲線上推算出樣品DNA濃度的log值,再推算出其濃度。
4. 如果把本試劑盒用于定性檢測(cè),只判斷陽(yáng)性或陰性,則陰性對(duì)照Ct必須沒(méi)有讀數(shù),或者大于或等于40。陽(yáng)性對(duì)照必須有熒光對(duì)數(shù)增長(zhǎng),有典型擴(kuò)增曲線,Ct值應(yīng)該小于40。對(duì)待測(cè)樣品,如果其Ct沒(méi)有讀數(shù)、大于或等于40則均為陰性,如果小于40則為陽(yáng)性。
樣品DNA,超純水,核酸純化試劑盒。
低溫運(yùn)輸,-20℃保存,有效期1年。
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