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志賀氏菌（Shigella）又稱(chēng)為痢疾桿菌，屬于革蘭氏陰性兼性細(xì)胞內(nèi)致病菌，臨床上可引起細(xì)菌性痢疾。志賀氏菌屬共有四個(gè)種48個(gè)血清型，包括痢疾志賀氏菌（Shigella dysenteriae）、福氏志賀氏菌（Shigella flexneri）、宋內(nèi)氏志賀氏菌（Shigella sonnei）和鮑氏志賀氏菌（Shigella boydii）。宋內(nèi)氏志賀氏菌常引起痢疾的暴發(fā)和流行，給全球人類(lèi)健康帶來(lái)極大的威脅。因此宋內(nèi)氏志賀氏菌的快速檢測(cè)具有重要意義。為此本公司以探針?lè)╭PCR技術(shù)為基礎(chǔ)開(kāi)發(fā)了宋內(nèi)氏志賀氏菌的檢測(cè)試劑盒，它具有下列特點(diǎn)：
規(guī)格及成分
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成分 |
規(guī)格 |
包裝 |
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2×Probe qPCR MasterMix |
500μL |
0.5mL本色蓋 |
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熒光PCR專(zhuān)用模板稀釋液 |
1mL |
1.5mL綠蓋管 |
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超純水 |
1mL |
1.5mL藍(lán)蓋管 |
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宋內(nèi)氏志賀氏菌qPCR引物-探針干粉 |
50次 |
0.5mL棕色管 |
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宋內(nèi)氏志賀氏菌陽(yáng)性對(duì)照(1E7拷貝/μL) |
50μL |
0.5mL黃蓋管 |
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使用手冊(cè) |
1份 |
1份 |
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本產(chǎn)品采用五孔盒包裝 |
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注 意：引物-探針干粉在使用前需要短暫離心，然后在離心管中加入165uL的超純水充分混勻后再使用，未用完的需要-20℃保存。 |
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使用方法
稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)樣品以1E1-1E6拷貝/μL這6個(gè)10倍稀釋度為例
由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分。本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照，只提供DNA片段作為陽(yáng)性對(duì)照。
1. 標(biāo)記6個(gè)離心管，分別為6，5，4，3，2，1。
2. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專(zhuān)用模板稀釋液，用帶芯槍頭（下同）。
3. 在6號(hào)管中加入5 μL 1E7拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照(試劑盒提供)，充分震蕩混勻1分鐘，得到1E6拷貝/μL的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭，在5號(hào)管中加入5 μL 1E6拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩混勻1分鐘，得到1E5拷貝/μL的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭，在4號(hào)管中加入5 μL 1E5拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照(上步所得)，充分震蕩混勻1分鐘，得到1E4拷貝/μL的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)樣品。放冰上待用。
6. 依次重復(fù)上面的操作得到6個(gè)稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)樣品。放冰上待用。
樣品DNA
低溫運(yùn)輸，-20℃保存，有效期2年
