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021-54845833/15800441009
錦鯉皰疹病毒 (Koi Herpesvirus，KHV)屬于皰疹病毒科鯉皰疹病毒屬，雙鏈DNA病毒, 其基因組大小約為295 kb。錦鯉皰疹病毒基因組主要包括囊膜蛋白基因、衣殼蛋白基因、DNA聚合酶基因(Sph)，螺旋酶基因和胸苷激酶基因(TK)等。錦鯉皰疹病毒病是由錦鯉皰疹病毒引起的一種傳染性疾病，該病毒主要感染鯉魚和錦鯉，出現(xiàn)癥狀后24h～48h死亡，病死率高達(dá)80%～100%。該病的病理變化主要表現(xiàn)為皮膚上出現(xiàn)白斑和水泡；鰓出血，產(chǎn)生大量粘液或組織壞死等，對(duì)水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)造成巨大損失，而TK基因又是錦鯉皰疹病毒重要的基因，因此快速檢測(cè)錦鯉皰疹病毒TK基因具有重要的意義。為此，本公司以探針法qPCR技術(shù)為基礎(chǔ)開發(fā)了錦鯉皰疹病毒TK基因的檢測(cè)試劑盒，它具有下列特點(diǎn)：
規(guī)格及成分
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成分 |
規(guī)格 |
包裝 |
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2×Probe qPCR MasterMix |
0.5mL |
0.5mL本色管 |
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熒光PCR專用模板稀釋液 |
1mL |
1.5mL綠蓋管 |
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超純水 |
1mL |
1.5mL藍(lán)蓋管 |
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錦鯉皰疹病毒TK基因qPCR引物-探針干粉 |
50次 |
0.5mL棕色管 |
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錦鯉皰疹病毒TK基因qPCR陽性對(duì)照(1E7拷貝/μL) |
50μL |
0.5mL黃蓋管 |
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使用手冊(cè) |
1份 |
1份 |
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本產(chǎn)品采用五孔盒包裝 |
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注 意： 引物-探針干粉在使用前需要短暫離心，然后在離心管中加入165μL的超純水充分混勻后再使用，未用完的需要-20℃保存。 |
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使用方法
稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品以1E1-1E6拷貝/μL這6個(gè)10倍稀釋度為例
由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對(duì)照，只提供無傳染性的DNA片段作為陽性對(duì)照。
1. 標(biāo)記6個(gè)離心管，分別為6、5、4、3、2、1。
2. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專用模板稀釋液，用帶芯槍頭，下同）。
3. 在6號(hào)管中加入5 μL 1E7拷貝/μL 的陽性對(duì)照(試劑盒提供)，充分震蕩1分鐘，得1E6拷貝/μL的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭，在5號(hào)管中加入5 μL 1E6拷貝/μL 的陽性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩1分鐘，得1E5拷貝/μL的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭，在4號(hào)管中加入5 μL 1E5拷貝/μL 的陽性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩1分鐘，得1E4拷貝/μL的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復(fù)上面的操作直到得到6個(gè)稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
樣品DNA，超純水，核酸純化試劑盒
低溫運(yùn)輸，-20℃保存，有效期1年
