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021-54845833/15800441009
細胞信息
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細胞名稱 |
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細胞品牌 |
通蔚生物 |
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種屬來源 |
人 |
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組織來源 |
脂肪 |
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生長特性 |
貼壁生長 |
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細胞形態(tài) |
成纖維細胞樣 |
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支原體檢測 |
無 |
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細胞簡介 |
脂肪間充質干細胞是從脂肪組織中分離得到的一種具有多向分化潛能的干細胞。主要恢復組織細胞的修復功能，促進細胞的再生，恢復年輕面容的同時，身體機能也得到充分改善，有效改善亞健康、早衰等疾病，由內而外真正的有效抵抗衰老。 脂肪間充質干細胞能夠在體外穩(wěn)定增殖且衰亡率低，同時它具有取材容易、少量組織即可獲取大量干細胞，適宜大規(guī)模培養(yǎng)，對機體損傷小等優(yōu)點，而且其來源廣泛，體內儲備量大，適宜自體移植，逐漸成為近年來新的研究熱點之一。 |
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質量檢測 |
纖維連接蛋白（Fibronectin）或波形蛋白（Vimentin）免疫熒光染色為陽性，純度高于 90%且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等 |
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細胞規(guī)格 |
5x10?cells/T25或1mL凍存管 |
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培養(yǎng)基 |
人脂肪干細胞專用培養(yǎng)基 |
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培養(yǎng)條件 |
氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃ |
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凍存條件 |
無血清凍存液，液氮儲存 |
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細胞代數 |
第1代 |
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細胞貨期 |
現貨 ，1周左右 |
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發(fā)貨方式 |
復蘇發(fā)貨（免運輸費用）/ 凍存發(fā)貨（需加干冰運輸費用） |
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供應范圍 |
僅限于科研實驗使用，絕不可作為動物或人類疾病的治療產品使用 |
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特別說明 |
具體操作步驟以隨貨產品說明書為主 |
細胞培養(yǎng)操作
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收貨處理 |
取出T25細胞培養(yǎng)瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2，飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h，以穩(wěn)定細胞狀態(tài) |
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細胞復蘇 |
將含有1 mL細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min，棄去上清液，加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或將細胞懸液加入6 cm皿中，加入約4 mL完全培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第三天換液并檢查細胞密度。 |
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傳代密度 |
細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng) |
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傳代比例 |
首次傳代建議1：2傳代，1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿 |
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傳代方法
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1. 吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細胞一次； 2. 添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中，輕微轉動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后，吸出多余胰蛋白酶消化液，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后，再加入5ml完全培養(yǎng)基終止消化； 3. 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代，然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)； 4. 待細胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察；之后每2-3天換液一次新鮮的完全培養(yǎng)基。 |
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細胞凍存 |
待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為例 a、收集細胞及細胞培養(yǎng)液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進行細胞計數。 b、根據細胞數量加入無血清細胞凍存液，使細胞密度5x106~ 1x107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細胞懸液，注意凍存管做好標識。 c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
注意事項
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重要提醒 |
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。 2. 在細胞培養(yǎng)過程中，請注意保持無菌操作。 3. 傳代培養(yǎng)過程中，胰酶消化時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài)。 4. 運輸用的培養(yǎng)基（灌液培養(yǎng)基）不能再用來培養(yǎng)細胞，請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。 |
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到貨須知 |
1. 收到細胞后，首先觀察并拍照記錄細胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現象，干冰運輸的細胞檢查干冰是否完全揮發(fā)，細胞是否解凍，若有上述現象發(fā)生請及時和我們聯系。 2. 靜置完成后，取出細胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照（當天以及第 2,3 天請拍照），記錄細胞狀態(tài) (所拍照片將作為后續(xù)服務依據)；建議細胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)。 3. 由于運輸的原因，部分細胞由于溫度變化及劇烈碰撞死亡破碎形成碎片，是正?，F象。個別敏感細胞會出現不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯系，告知細胞的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。 4. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等，確保細胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導致細胞出現問題，責任由客戶自行承擔。 |
售后服務
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細胞予重發(fā) |
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1. 細胞運輸中遭遇的各種問題，細胞丟失瓶身破損、培養(yǎng)液嚴重漏液等，重發(fā)。 |
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2. 收到細胞未開封，如出現污染狀況，重發(fā)。 |
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3. 收到細胞3天內，發(fā)現污染問題，經核實后，重發(fā)。 |
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4. 常溫發(fā)貨細胞靜置2小時后，干冰凍存發(fā)貨細胞復蘇2天后，絕大多數細胞未存活，經核實后，重發(fā)。 |
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5. 常溫發(fā)貨的細胞靜置22小時且未開封或干冰凍存發(fā)貨的細胞復蘇2天后，出現污染經核實后，重發(fā)。 |
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6. 細胞活性問題在收到產品3天內提出真實實驗結果，用臺盼藍染色法鑒定細胞活力，經核實后，重發(fā)。 |
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細胞不予重發(fā) |
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1. 客戶操作造成細胞污染，不重發(fā)。 |
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2. 客戶嚴重操作失誤致細胞狀態(tài)不好，不重發(fā)。 |
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3. 非我們推薦細胞培養(yǎng)體系致的細胞狀態(tài)不好，不重發(fā)。 |
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4. 細胞狀態(tài)不好，未提供真實清晰的培養(yǎng)前3天的細胞狀態(tài)照片，不重發(fā)。 |
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5. 細胞培養(yǎng)時經其它處理導致細胞出現問題的，不重發(fā)。 |
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6. 收到細胞發(fā)現問題與客服人員溝通的時間證明大于3天的，不重發(fā)。 |
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特別說明 |
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上海通蔚生物客戶在細胞培養(yǎng)過程中，有任何技術問題可以撥打免費服務電話021-54845833或15800441009，我們隨時給予實驗中的免費解答。 |
