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021-54845833/15800441009
上海通蔚公司匯集了一批專業(yè)的細胞生物學技術人員，所有細胞入庫之前均經(jīng)過嚴格的細胞質(zhì)量檢測和鑒定，所有細胞在出庫之前均經(jīng)過一次嚴格的質(zhì)檢認證，確保細胞到每一位用戶手里都是最好狀態(tài)。
NCI-H838人非小細胞肺癌細胞
RPMI1640(w/oHepes)10%FBS
細胞生長：貼壁生長
細胞形態(tài)：上皮樣
細胞數(shù)量：1×106個細胞數(shù)
細胞傳代：1：3傳代
細胞特性：該細胞于1984年建系源于一位59歲患有非小細胞肺癌的白人男性吸煙者從患者淋巴結轉(zhuǎn)移灶分離而來
細胞純度：95％
細胞活力：87％（ViabilitybyTrypanBlueExclusion）
細胞檢測：細胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌
細胞凍存：液氮凍存（基礎培養(yǎng)基+10%DMSO+20%FBS）
細胞運輸：干冰運輸（1Vial）或活細胞運輸（T-25flasks）
細胞用途：只可用于科研不可用于臨床診斷和治療
胞培養(yǎng)條件：
1、培養(yǎng)基：RPMI-1640培養(yǎng)基（不含Hepes）+ 10%胎牛血清+ 1%雙抗+800ng/ml Taxol
2、溫度：37.0°C
3、氣體:空氣 95%，CO2 5%
培養(yǎng)方法：
收到細胞后，在倒置顯微鏡下觀察整個細胞生長情況：
如果細胞未長滿，用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內(nèi)，嚴格無菌操作，打開細胞培養(yǎng)瓶，留10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
如果細胞已長滿（達80-90%）。即可進行傳代，具體步驟如下：
a，棄去培養(yǎng)液，用PBS洗1-2次。
b，向瓶內(nèi)加入1.0-2.0ml胰蛋白酶液，在倒置顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓，迅速拿回操作臺，吸取胰蛋白酶，加含有6ml 含10%血清的培養(yǎng)液，輕輕吹打細胞。
c，加入等量的的培養(yǎng)液，輕輕吹打混勻后吸出一半，分到新的培養(yǎng)
d，傳代比例：1:2-1:3
溫馨提示：培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)液是加入最高藥物濃度的，為800ng/ml。我們采取緩慢增加藥物的梯度的方法。具體步驟是，首先加含200ng/mlTaxol藥物的培養(yǎng)液，放入培養(yǎng)箱，這段時間會有小部分細胞懸浮起來，屬于正常情況，通過換液可以去掉，等細胞待長滿就可以消化傳代了，這時可以一直用含藥物培養(yǎng)液來消化培養(yǎng)細胞，一兩代之后就可以將藥物濃度提高到500ng/ml，兩代后可以將藥物濃度提高至最高水平800ng/ml，含藥物培養(yǎng)液用于細胞培養(yǎng)都沒有問題，凍存的時候就不要在凍存液里加藥物了。
保存和應用：
客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞，如是新鮮原代細胞，客戶收到細胞后應立即將其放入CO2細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h，再進行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細胞，客戶收到細胞后應立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復蘇。
復蘇的原則：
在實際操作中，凍存細胞要進行復蘇，再培養(yǎng)傳代。復蘇細胞一般采用快速融化法。以保證細胞外結晶快速融化，以避免慢速融化水分滲入細胞內(nèi)，再次形成胞內(nèi)結晶損傷細胞。
如何選購優(yōu)質(zhì)的
NCI-H838人非小細胞肺癌細胞
1）該細胞只能用于科研，不得用于臨床應用。
2）收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。
3）仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等。
4）用75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落，將細胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)過夜，隔天再取出觀察。此時多數(shù)細胞均會貼壁，若細胞仍不能貼壁請用臺盼藍染色測定細胞活力，如果證實細胞活力正常，請將細胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng)；如果染色結果顯示細胞無活力，請拍下照片及時和我們聯(lián)系，信息確認后我們?yōu)槟倜赓M寄送一次。
5）請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶內(nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用，細胞傳代時可以一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合，使細胞逐漸適應培養(yǎng)條件;建議直接購買我司提供的完全培養(yǎng)基。
6）建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和我司技術部溝通交流。
售后服務：
1)發(fā)貨時附：細胞實拍圖片兩張、細胞培養(yǎng)說明、細胞操作處理方法、細胞質(zhì)量問題反饋表等。
2）細胞污染問題，請在收到產(chǎn)品48小時內(nèi)給我們真實的實驗結果；細胞活性問題，請在收到產(chǎn)品7天內(nèi)給我們真實的實驗結果，我們調(diào)查核實后予免費調(diào)換，不收取任何費用。
3）如用戶收到細胞8-15天之內(nèi)因處理不當造成細胞死亡或污染，我公司將以6.5折優(yōu)惠價重新提供一株原細胞。
4）如用戶在16-30天內(nèi)因處理不當造成細胞死亡或污染，我公司將以8折優(yōu)惠價重新提供一株原細胞。
